Diabetologia：激活但功能受損的記憶Tregs在1型糖尿病病人進展緩慢的過程中逐漸擴展

從第一次浮現去甲自身抗軀到浮現1DF癌癥針灸副作用的令人滿意不下在幼兒中期就有很好的闡述，多個去甲自身抗軀白血病的幼兒中所有70%在肝細胞轉成后10年內患上癌癥，而隨訪15年的幼兒這一人口比例減小到84%。相對來說之下，%針灸1DF癌癥一半以上的DF1DF癌癥的中風機制還無法獲得應有的科學研究。

愈發多的人開始用到再行系統來定義1DF癌癥的令人滿意：個軀在浮現多種去甲自身抗軀時帶入第1過渡期，浮現濃度異常時帶入第2過渡期，浮現副作用時帶入第3過渡期。一些多發去甲自身抗軀白血病的個軀，在1期和2期，令人滿意較慢，并拓展為中風的1DF癌癥。我們之前闡述了一第三組在首次安全檢查到多種去甲自身抗軀樣本后據估計10年無癌癥的正因如此慢令人滿意者，這第三組病患者數量少，但特性比較明確。隨后，我們挖掘出去甲自身蛋白免疫CD8+T細胞核反應會在令人滿意加速的病患者中所基本不發揮作用，但在最近中風和依然發揮作用的癌癥病患者中所很容易安全檢查到。這可能證明，與令人滿意病患者相對來說，這些病患者自身免疫會的可調加強。

早期科學研究證明，盡管可調性T細胞核(Treg)數量也就是說，但癌癥病患者發揮作用一些機制瑕疵，其中所最主要對IL-2的反應會戰斗能力提高。此外，癌癥病患者中所的物理現象CD4+T細胞核可能對可調正因如此具抵抗性，平庸為物理現象T細胞核的消除減弱，自然產生的Treg和軀外產生的抑止Treg，以及蛋白歷程的CD4+T細胞核中所IL-2反應會減弱。本科學研究的最終目標是闡述了CD4+可調性T細胞核(Treg)在這群人正因如此加速令人滿意者中所的特性，他們的為數為43歲(31-72歲)，隨訪時間為18-32年。

新方法：BOX科學研究是一項以許多人為基礎的縱向科學研究，在21歲以下確診的病患者親屬中所安全檢查1DF癌癥的危險環境因素。我們之前闡述了依然加速令人滿意者的特性，他們保持良好多重去甲自身抗軀白血病最少10年，但無法浮現癌癥的針灸副作用，慢性或非性虐待自身免疫。隨后，10名繼續保持良好無癌癥并想要提供者大量血液樣本的加速令人滿意者納入T和B細胞核機制分析。在目前的科學研究中所，8名慢令人滿意者(SP第三組)，中所位年齡43歲(31-72歲)，18 - 32歲之間的去甲自身抗軀白血病。所有的參加者都位處1DF癌癥令人滿意的1期，盡管一些人隨后保住了去甲自身抗軀對某些蛋白的白血病反應會，然而，一名病患者已經位處2期據估計6年，但無法浮現針灸副作用，一名病患者被病癥為癌癥，該受試者72歲，在采自實驗樣本時，其HbA1c上升到53 mmol/mol(7%)，在研究小組中所對該遺傳物質順利進行了原則上指標。受控外周血單個核反應細胞核(PBMCs)，采用多參數流式細胞核法術和T細胞核消除試驗指標遺傳物質中所Treg的高頻不下、表DF和機制。用到FlowSOM和CITRUS(聚類深入研究、表征和緊接)順利進行無委派聚類分析，指標Treg表DF。

結果：與肥胖癥遺傳物質相對來說，來自慢令人滿意軀的無意識CD4+T細胞核的委派聚類推斷，轉錄的無意識CD4+ Treg高頻不下減小，與糖皮質激素抑止的TNFR相關蛋白(GITR)隱含減小有關。一名HbA1c上升的病患者與令人滿意加速者和匹配的解讀第三組相對來說，Treg可知略有不同。機制分析證明，與肥胖癥遺傳物質相對來說，來自加速令人滿意軀的Treg介導的CD4+物理現象T細胞核消除明顯損毀。平庸為對物理現象CD4+T細胞核CD25和CD134隱含的消除減小。

所示1 深入的表DF分析推斷，CD4+Treg亞DF在慢令人滿意隊列中所減小。由FlowSOM轉成成的Treg寢室，聚集在來自所有遺傳物質的活著CD4+CD45RA -細胞核上。根據上面物隱含深入研究出10個元簇:無意識T細胞核_1;無意識T cell_2;無意識T cell_3;無意識T cell_4;CD49b無意識T細胞核;HLA-DR + GITR +無意識T細胞核;緩存Treg_1;緩存Treg_2;緩存Treg_3;和緩存Treg_4。(a)用到9個不同Treg上面轉成成的10個元簇的MST。每個節點代表一個戰斗群(100個戰斗群)，更大的元戰斗群(10個元戰斗群)在節點第三組周圍手繪。每個節點中所的面包所示暗示單個上面的隱含級別。(b)每個元聚類的熱所示，以推斷整軀上面隱含。(c, d)為HD第三組(c)和SP第三組(d)轉成成所示，以及FlowSOM比對的每個元簇的裂口。(e-l)相對來說較稀土元素為每個metacluster筒本站所示(稀土元素> 0.05%)確定為HD和SP第三組:緩存Treg_2 (e),緩存Treg_3 (f),緩存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +無意識T細胞核(h)、無意識T cell_1(i),無意識T cell_2 (j),無意識T cell_3 (k) n d CD49b無意識T細胞核(l)。深藍色紅色代表這些年來SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon相加符號秩檢驗。此鍵適用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 用到CITRUS的預測模DF證實，Treg高頻不下的減小是令人滿意加速的圖案。分級旁路(a - f)和甜菜分析(g-k)比起SP參加者和匹配的HD參加者在CD4+CD45RA?T細胞核上的差異。(a)親本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群軀的代表性所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3摻入，然后通過HLA-DR和GITR隱含順利進行受控，模擬FlowSOM群軀。(b) HD(橫紋)和SP(藍點)第三組以及遺傳物質SP 606(深藍色)中所CD25+ cd127的高頻不下匯總所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+旁路子集的筒本站所示;(c) HLA-DRloGITR?(緩存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(緩存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(緩存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+緩存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋狀由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隱含高強度填充，箭頭突出的簇被比對為SP和HD隊列之間的不同。(j)筒本站所示推斷了在SP(藍點)和HD(灰點)第三組中所，CITRUS無意識Treg_3和Treg_4的相對來說較稀土元素(人口比例)。(k)直方所示推斷每個簇的表DF(暗紅色)和Treg上面相對來說較隱含與氛圍隱含(藍色);上列，緩存Treg_3;下面幾幾天后，緩存Treg_4。氛圍與所有其他簇中所上面的隱含有關。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon相加符號秩檢驗

所示3 與肥胖癥獻血者相對來說，令人滿意加速者無意識treg的GITR減小。每個無意識CD4+T細胞核元簇(無意識T細胞核_1;無意識T cell_2;無意識T cell_3;CD49b +無意識T細胞核;HLA-DR + GITR +無意識T細胞核;緩存Treg_2;緩存Treg_3;來自FlowSOM的memory Treg_4)安全檢查每個隱含上面的變化。(a,b)來自HD (a)和S (b)隊列的隱含熱所示(sp606不最主要在內)。(c,d)無意識Treg_4元簇中所所有HD(灰色)、所有SP(藍色)和SP 606(深藍色)的FlowSOM GITR隱含聯結，推斷直方所示(c)和匯總所示(d)。Wilcoxon相加符號秩和檢驗，p< 0.07(深藍色)所有遺傳物質最主要，p< 0.05(藍色)遺傳物質SP 606和匹配的HD不最主要在測試中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR隱含，從分級旁路，從所有HD(灰色)、所有SP(藍色)和SP 606(深藍色)聯結，推斷直方所示(e)和匯總所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon相加符號秩檢驗

所示4 來自加速令人滿意的CD4+ treg細胞核控制物理現象CD4+T細胞核的戰斗能力提高。SP第三組用藍色的本站和紅色暗示，HD第三組用金色的本站和紅色暗示，深藍色的本站/紅色暗示遺傳物質sp606。用到CD4+CD25+ Treg分選試劑盒對CD4+T細胞核順利進行分選。CD4+CD25?(應答者)被上面為CFSE, Treg按通過觀察的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸細胞核，指導3幾天后順利進行流式細胞核法術安全檢查。(a-d)與CD4+應答者相對來說較應的treg指導(自軀)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg與HD應答者指導。(a,b,f) CFSE游離(a,e)和CFSE消除%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除%-。用到白血病解讀(轉錄的響應細胞核不含treg)推算消除%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重復測量雙向方差分析。?p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起測試

所示5 物理現象CD4+T細胞核對加速令人滿意的T細胞核酪氨酸的消除更敏感。SP第三組用藍色的本站和紅色暗示，HD第三組用金色的本站和紅色暗示，深藍色的本站/紅色暗示遺傳物質sp606。用到CD4+CD25+Treg分選試劑盒對CD4+T細胞核順利進行分選。CD4+CD25?(應答者)被cfsel上面，treg按通過觀察的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸細胞核，指導3幾天后順利進行流式細胞核法術(CD25反染)和細胞核因子分析。HD Treg與HD、SP或sp606應答者聯合指導。(a,b) CFSE游離(a)和CFSE消除百分不下(b)。(c,d) CD25消除百分不下(c)和CD134消除百分不下(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指導中所的隱含。***p< 0.001， **p< 0.01，重復測量雙向方差分析。?p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起測試

結論：我們給出的結論是，來自加速令人滿意子的酪氨酸無意識CD4+Treg在GITR隱含中所獲得了擴展和充沛，強調了進一步科學研究Treg在1DF癌癥不確定性個軀中所的異質性的合理性。

譯者出處：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28